[샘플] SEC Predictor — IgG 150kDa 용출 부피 예측 검증

사용한 계산기

🧫 SEC Retention Predictor

계산기 입력값

• 분자: IgG monomer (150 kDa)
• 유체역학적 반경(Rh): 5.3 nm
• 컬럼 기공 크기: 200 Å (r_pore = 10 nm)
• 컬럼: 7.8×300mm SEC 컬럼

계산기 출력값

• λ (Size Ratio): 0.530
• Ksec: 0.221
• 예측: 부분 침투 영역 (V₀ < Ve < Vt)

문헌 기대값

• Laurent & Killander (J. Chromatogr. 1964): Ksec = (1−λ)² = (1−0.53)² = 0.221 ✓
• GE Healthcare SEC Handbook:
  • IgG(150kDa)는 200Å 기공에서 부분 침투 → V₀와 Vt 사이에서 용출 ✓
  • 300Å 기공에서는 Ksec 증가 → 더 늦게 용출
• Waters BioResolve SEC 가이드: IgG monomer Rh ≈ 5.0–5.5 nm ✓

일치도

• Ksec 계산이 Laurent & Killander 이론과 정확히 일치합니다.
• 부분 침투 예측이 실제 SEC 분리 거동과 일치합니다.

참고사항

• IgG aggregate(dimer, trimer)는 Rh가 더 크므로 Ksec가 작아져 먼저 용출됩니다.
• 기공 크기 선택: monomer/aggregate 분리 시 200–300Å이 일반적입니다.

ℹ️ 본 예시는 Laurent & Killander (1964) 이론 및 GE Healthcare SEC Handbook을 기반으로 작성되었습니다.